巨核细胞祖细胞集落测定的胶原基培养基

megadult™-C是一种基于胶原蛋白的培养系统,用于人类或小鼠造血组织巨核细胞祖细胞(CFU- mk)的集落形成单位(CFU)检测。1巨核细胞集落很难单独通过形态学标准检测,因为集落可能只有3个细胞,而且巨核细胞在形态学上很难与其他细胞系,特别是巨噬细胞区分开来。与用于其他血统CFU检测的甲基纤维素培养基不同,MegaCult™中使用的胶原凝胶可以很容易地脱水,用于随后的细胞化学或免疫细胞化学染色。MegaCult™中的人CFU-Mk集落检测基于巨核细胞标记CD41的免疫细胞化学染色,而小鼠集落检测基于乙酰胆碱酯酶活性。

MegaCult™培养基有带或不带细胞因子或添加脂质的格式。含有细胞因子的MegaCult™培养基含有重组人(rh) IL-3、IL-6和TPO,用于人CFU-Mk的最佳生长。不含细胞因子的MegaCult™培养基推荐用于需要控制细胞因子类型和数量的应用,例如用于研究影响巨核祖细胞生长和成熟的因素。不含细胞因子的MegaCult™-C培养基也用于小鼠CFU-Mk的培养和计数,添加适当的细胞因子,如重组细胞鼠标IL-3, rhIL-6, rhIL-11, rhTPO和/或其他因素,由用户选择。

MegaCult™- c
完整的包

格式(媒体):

  • 24 × 2ml管(含细胞因子)
  • 24支1.7 mL试管(仅限培养基)

物种:

人类

细胞因子:

有或没有重组细胞因子

包含:

  • 胶原蛋白溶液
  • 媒介
  • CFU-Mk染色试剂盒
  • 双腔滑梯

应用程序:

脐带血、骨髓和外周血巨核细胞祖细胞的培养和计数。

MegaCult™- c
胶原蛋白和培养基

格式(媒体):

  • 24 × 2ml管(含细胞因子)
  • 24支1.7 mL试管(仅限培养基)

物种:

  • 人类
  • 鼠标

细胞因子:

可添加重组细胞因子(仅限人)或不添加(人或小鼠)

包含:

  • 胶原蛋白溶液
  • 媒介

应用程序:

  • 人脐带血、骨髓和外周血的CFU-Mk检测。
  • 小鼠骨髓的CFU-Mk测定。需要添加细胞因子。

MegaCult™- c
胶原蛋白和脂质培养基

格式(媒体):

50毫升一瓶

物种:

  • 人类
  • 鼠标

细胞因子:

没有添加细胞因子

包含:

  • 胶原蛋白溶液
  • 含脂培养基

应用程序:

  • 人脐带血、骨髓和外周血富集祖细胞制剂的CFU-Mk测定。需要添加细胞因子。
  • 小鼠骨髓的CFU-Mk测定。需要添加细胞因子。
  • 在添加用户选择的适当细胞因子后,CFU检测其他祖细胞。
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数据

图1所示。源自人类巨核细胞祖细胞的中小型CFU-Mk菌落的例子



协议

图2。人巨核细胞祖细胞测定方法

Procedure for Assays of Mouse Megakaryocyte Progenitors

图3。小鼠巨核细胞祖细胞测定方法



关键应用程序

药物毒性试验

Pessina A等(2009)应用人CFU-Mk试验预测药物潜在的血小板毒性。体外毒物学23(1):194-200

巨核细胞生物学

参考文献

  1. hoge D等(1997)使用标准化无血清琼脂糖测定法定量和表征人巨核细胞集落形成细胞。中华血液学杂志,1996(4):790- 798。
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