MegaCult™培养基用于CFU-Mk检测
巨核细胞祖细胞集落测定的胶原基培养基
megadult™-C是一种基于胶原蛋白的培养系统,用于人类或小鼠造血组织巨核细胞祖细胞(CFU- mk)的集落形成单位(CFU)检测。1巨核细胞集落很难单独通过形态学标准检测,因为集落可能只有3个细胞,而且巨核细胞在形态学上很难与其他细胞系,特别是巨噬细胞区分开来。与用于其他血统CFU检测的甲基纤维素培养基不同,MegaCult™中使用的胶原凝胶可以很容易地脱水,用于随后的细胞化学或免疫细胞化学染色。MegaCult™中的人CFU-Mk集落检测基于巨核细胞标记CD41的免疫细胞化学染色,而小鼠集落检测基于乙酰胆碱酯酶活性。
MegaCult™培养基有带或不带细胞因子或添加脂质的格式。含有细胞因子的MegaCult™培养基含有重组人(rh) IL-3、IL-6和TPO,用于人CFU-Mk的最佳生长。不含细胞因子的MegaCult™培养基推荐用于需要控制细胞因子类型和数量的应用,例如用于研究影响巨核祖细胞生长和成熟的因素。不含细胞因子的MegaCult™-C培养基也用于小鼠CFU-Mk的培养和计数,添加适当的细胞因子,如重组细胞鼠标IL-3, rhIL-6, rhIL-11, rhTPO和/或其他因素,由用户选择。
数据

图1所示。源自人类巨核细胞祖细胞的中小型CFU-Mk菌落的例子
协议

图2。人巨核细胞祖细胞测定方法

图3。小鼠巨核细胞祖细胞测定方法
关键应用程序
药物毒性试验
人造血干细胞的移植和植入动力学
皮尔逊等人(2006)尽管在体外对造血祖细胞生长有抑制作用,酪氨酸激酶抑制剂伊马替尼并不影响人CD133+细胞在NOD/SCIDbeta2mNull小鼠中的植入。干细胞24(7):1814-1821
巨核细胞生物学
Boyer L等人(2008)脐带血CD34+细胞使用短两相培养系统提高了接近纯度的巨核细胞的产量。[J] .免疫学杂志,32(2):82-91
Vodyanik M等(2006)白细胞介素(CD43)在人胚胎干细胞分化培养中定义造血祖细胞。中华医学杂志(6):2095-2105821
生物公司
Migliaccio A等人(2003)小鼠GATA-1low突变体表型揭示了GATA-1作为肥大细胞分化的调节因子。中华检验医学杂志,1999,19 (3):391 - 391
伊藤等(2003)Sca-1/ ly - 6a缺失小鼠的造血干细胞和祖细胞缺陷。
血液学杂志(2):517-523
王毅等(2011)通过c末端修饰对p53活性进行微调可显著促进HSC稳态和小鼠放射敏感性。基因工程学报,25(13):1426-1438
Lannutti B et al. (2008)在Mpl -/-小鼠中,Mpl表达的不完全恢复产生了干细胞再填充缺陷和悖论性血小板增多的部分纠正。中国检验医学杂志(8):1778-1785
Hisa et al. (2004)Meis1突变动物的造血、血管生成和眼部缺陷。Embo, 23(2): 450-459
邢胜等(2008)JAK2V617F的转基因表达导致小鼠骨髓增生性疾病。中国医学杂志(10):5109-5117
werning G等人(2006)在小鼠骨髓移植模型中,Jak2V617F的表达导致一种与骨髓纤维化相关的红细胞增多症样疾病。中华医学杂志(11):474 - 481
穆迪等人(2004)Pten+/- ship -/-小鼠的贫血、血小板减少、白细胞增多、髓外造血和祖细胞功能受损:一种新的骨髓发育不良模型。中国生物医学工程杂志(12):444 - 444
参考文献
- hoge D等(1997)使用标准化无血清琼脂糖测定法定量和表征人巨核细胞集落形成细胞。中华血液学杂志,1996(4):790- 798。