人类和小鼠造血祖细胞CFU测定的自动化和标准化计数

STEMvision™台式仪器和计算机系统是专门为造血菌落的自动成像和计数设计的吗菌落形成单位(CFU)测定. 而不是手动识别和计数菌落使用显微镜,用户只需加载一个SmartDish™培养皿中含有多达6个单独的CFU测定 MethoCult™ 将介质放入自动CFU计数器。该仪器捕获每35mm孔的图像,然后使用专用软件对每种类型的分析进行分析。通过使用自动化CFU计数器来标准化菌落计数,脐带血库、移植实验室和研究实验室可以确保其CFU检测结果准确且可重复。

如何用STEMvision™标准化造血菌落计数

观看如何使用的分步指南STEMvision™用于CFU检测中造血菌落的自动成像和计数。

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为什么使用STEMvision™?

  • 获得比人工计数更准确的菌落计数。
  • 软件减少了菌落计数中个体之间和个体内部以及实验室的差异。
  • 标准化的软件减少了培训新学生和员工识别和计数菌落的时间。
  • 培养井被数字化成像,以便永久保存。

STEMvision™用于人类和小鼠CFU检测的自动CFU计数

人类7天

Human 7 Day

电池类型:

脐带血

MethoCult™媒体:

图像输出:

整个35毫米培养的黑白图像和标记菌落

数据输出:

所有菌落的总数

成像时间:

30秒

分析时间:

30秒

人类14天

Human 14 Day

电池类型:

  • 脐带血
  • 骨髓
  • 动员的外周血

图像输出:

彩色图像突出血红的红系菌落,标记出菌落的亚类

数据输出:

菌落亚型差异计数(CFU-E、BFU-E、CFU-G/M/GM、cfu - gem)

成像时间:

1分钟

分析时间:

1分钟

小鼠7-14天

Mouse 7-14 Day

电池类型:

骨髓

图像输出:

整个35毫米培养井的黑白图像,标记有4个大小等级的菌落

数据输出:

在特定谱系的MethoCult™培养基中所有菌落的总数

成像时间:

30秒

分析时间:

30秒

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崩溃细节


数据

Automated CFU counter, STEMvision™, images and analyses human CFU colonies

图1所示。代表性STEMvision™图像显示人类脐带血祖细胞培养7天后衍生的菌落MethoCult™表达培养14天后,从人脐带血、骨髓和动员外周血祖细胞中提取MethoCult™最优

这些图像是由STEMvision™人(A) 7天和(b) 14天分析包. 绿色圆圈表示7天脐带血CFU检测中的单个菌落,该检测仅对总CFU评分(a)。在14天脐带血(B)、骨髓(C)和动员的外周血(D) CFU检测中,橙色和红色圆圈代表红系菌落,黄色圆圈代表髓系菌落,蓝色圆圈代表混合菌落。含有血红细胞的红系和混合菌落显示为真红色。



Automated CFU counter, STEMvision™, images and analyses mouse CFU colonies

图2。代表性STEMvision™图像显示小鼠骨髓祖细胞培养12天后获得的菌落MethoCult™GF M3434, MethoCult™GF M3534或MethoCult™SF M3436 Media

使用STEMvision™获得(A) MethoCult™GF M3434、(B) MethoCult™GF M3534和(C) MethoCult™SF M3436中培养的小鼠骨髓细胞的图像。相应的STEMvision™小鼠分析包(即总CFU分析包(A)、髓系CFU分析包(B)或红细胞CFU分析包(C))对每张图像进行分析。红色圆圈表示最小的菌落-大小为1级,黄色圆圈-大小为2级,蓝色圆圈-大小为3级,橙色圆圈表示最大的菌落-大小为4级。

应用程序和法规遵从性

除了定量测定正常造血样本中的祖细胞数量和亚型外,CFU测定还可用于比较修饰后样本的相对祖细胞功能。通过这种使用,CFU检测和STEMvision™已成为开发新的细胞和基因疗法的重要工具,包括CD34检测+体外扩增、修饰或编辑(例如使用CRISPR-Cas9)的细胞。

更高的合规环境,如质量控制或制造部门可能面临额外的要求,如遵守FDA Title 21 CFR Part 11关于电子记录的规定。STEMvision™软件套件专为研究用途(RUO)应用而设计。然而,STEMvision™可以通过添加STEMvision™21 CFR Part 11合规软件附加组件(目录#500-0110)来支持符合21 CFR Part 11法规。

STEMvision™21 CFR Part 11合规软件附加组件提供了许多功能,以提高电子记录的安全性,包括:

  • 用户身份验证和受限访问级别
  • 电子签名(仅限人工分析包)
  • 记录软件事件和创建审计跟踪

有关详情,请参阅STEMvision™产品页面, STEMvision™手册,或联系我们. 了解更多关于我们的方法和质量承诺,以及我们如何支持您的监管和合规,请访问我们的STEMCELL的质量页面。


CFU检测资源

探索我们的资源信息和支持,建立,优化和标准化CFU分析。


CFUs against an orange background

介绍STEMvision™自动CFU评分课程

了解如何在这个自定进度的数字课程中使用STEMvision™标准化和自动化CFU分析的评分。您将获得访问讲座,一步一步的协议视频,和策划资源库。

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