用于LTC-IC检测的MyeloCult™培养基
人和小鼠造血祖细胞的长期培养
MyeloCult™培养基已开发用于长期培养与贴壁基质细胞相关的造血祖细胞。髓细胞干细胞(MyeloCult™)的一个重要应用是对骨髓中原始造血祖细胞的定量分析长期培养起始细胞(LTC-IC)试验。在该实验中,将造血细胞培养在含有支持性人或小鼠基质细胞层的MyeloCult™培养基中,并通过在a中复制细胞,测试其产生髓系克隆祖细胞的能力数周菌落形成单位(CFU)测定使用 媒介。
为什么使用MyeloCult™?
- 在“dexter型”长期骨髓培养中建立基质细胞层和培养造血祖细胞。1,2
- 在髓细胞培养液中进行LTC-IC分析。3
- 研究长期培养中骨髓形成的调节因子。3
协议

图1所示。限制稀释长期培养起始细胞(LTC-IC)试验程序

图2。批量培养LTC-IC试验程序
关键应用程序
人造血细胞培养
Nemeth M等人(2009)骨髓微环境中β -连环蛋白的表达是原始造血细胞长期维持所必需的。干细胞27(5):1109-1119
Tipping A et al. (2009)GATA-2高表达通过影响细胞周期抑制人造血干细胞和祖细胞功能。血
Peterson M等人(2008)通过接头Crk的酪氨酸磷酸化抑制受体信号传导。豁免29(4):578-588
Carlo-Stella C等人(2007)胎盘生长因子-1增强粒细胞集落刺激因子诱导小鼠和非人灵长类动物的造血祖细胞动员。干细胞,25(1):252-261
Pastos K et al. (2006)重组血小板生成素和骨髓基质条件培养基对新生儿和成人巨核细胞的不同影响。中国生物医学工程杂志(10):369 - 369
Sloand et al. (2006)粒细胞集落刺激因子优先刺激携带同种异型IV受体的单体7细胞的增殖。自然科学进展,30 (3):483- 488
皮尔逊等人(2006)尽管在体外对造血祖细胞生长有抑制作用,酪氨酸激酶抑制剂伊马替尼并不影响人CD133+细胞在NOD/SCIDbeta2mNull小鼠中的植入。干细胞24(7):1814-1821
Takeda A等人(2006)NUP98-HOXA9诱导人CD34+造血细胞的长期增殖并阻断其分化。巨蟹座研究,66(13):6628-6637
Giebel B等人(2006)原始的人造血细胞在最初的细胞分裂过程中产生不同的子细胞。《中华医学杂志》(5):349 - 349
Srour et al. (2005)G0中人CD34+CD38-/lo细胞体外增殖动力学和原始造血潜能的调节中国生物医学工程杂志(8):391 - 391
Selleri C等(2005)尿激酶型纤溶酶原激活物受体在造血干细胞动员中的作用。中国生物医学工程学报(英文版)
Giebel B等人(2004)极化人造血干细胞和祖细胞中CD133等脂筏标记物的分离。中华医学杂志(8):2332-2338
Kogler G等人(2004)一种具有多能分化潜能的胎盘脐带血人体细胞干细胞。中国生物医学工程学报,2004,22 (2):444 - 444
关勇等(2003)急性髓性白血病(AML)患者静止原始白血病祖细胞的检测、分离和刺激。中华医学杂志(8):342 - 349
Bartolovic K et al. (2004)伊马替尼对体外正常祖细胞的抑制作用。中国医学杂志(2):523-529
Stier S等人(2003)体外靶向p21Cip1/Waf1允许人类造血干细胞的相对扩增。中国医学杂志(4):1260-1266
Danet G等人(2003)缺氧条件下人类scid再生细胞的扩增。中国临床医学杂志[J] . 32 (1): 1 - 4
迪比达尔等人(2003)人重组造血干细胞在活跃的细胞循环中上调Fas表达,但对Fas诱导的抑制仍有抵抗力。中国检验医学杂志(1):118-126
Punzel M et al. (2003)人造血祖细胞初始分裂的对称性仅受细胞微环境的影响。实验血液学31(4):339-347
Murdoch B et al. (2003)Wnt-5A增强了人造血干细胞在体内的再生能力和原始造血发育。中国科学院学报,100(6):3422-3427
Kootstra N等人(2003)取消猴细胞中基于hiv -1的慢病毒载体转导的入境后限制。科学通报,2006 (3):1298-1303
Bhatia M et al. (1998)一类新发现的具有scid再生活性的人造血细胞。中华医学杂志(9):1038-1045
迪比达尔等人(2003)人重组造血干细胞在活跃的细胞循环中上调Fas表达,但对Fas诱导的抑制仍有抵抗力。中国检验医学杂志(1):118-126
Tipping A et al. (2009)GATA-2高表达通过影响细胞周期抑制人造血干细胞和祖细胞功能。血
Peterson M等人(2008)通过接头Crk的酪氨酸磷酸化抑制受体信号传导。豁免29(4):578-588
Carlo-Stella C等人(2007)胎盘生长因子-1增强粒细胞集落刺激因子诱导小鼠和非人灵长类动物的造血祖细胞动员。干细胞,25(1):252-261
Pastos K et al. (2006)重组血小板生成素和骨髓基质条件培养基对新生儿和成人巨核细胞的不同影响。中国生物医学工程杂志(10):369 - 369
Sloand et al. (2006)粒细胞集落刺激因子优先刺激携带同种异型IV受体的单体7细胞的增殖。自然科学进展,30 (3):483- 488
皮尔逊等人(2006)尽管在体外对造血祖细胞生长有抑制作用,酪氨酸激酶抑制剂伊马替尼并不影响人CD133+细胞在NOD/SCIDbeta2mNull小鼠中的植入。干细胞24(7):1814-1821
Takeda A等人(2006)NUP98-HOXA9诱导人CD34+造血细胞的长期增殖并阻断其分化。巨蟹座研究,66(13):6628-6637
Giebel B等人(2006)原始的人造血细胞在最初的细胞分裂过程中产生不同的子细胞。《中华医学杂志》(5):349 - 349
Srour et al. (2005)G0中人CD34+CD38-/lo细胞体外增殖动力学和原始造血潜能的调节中国生物医学工程杂志(8):391 - 391
Selleri C等(2005)尿激酶型纤溶酶原激活物受体在造血干细胞动员中的作用。中国生物医学工程学报(英文版)
Giebel B等人(2004)极化人造血干细胞和祖细胞中CD133等脂筏标记物的分离。中华医学杂志(8):2332-2338
Kogler G等人(2004)一种具有多能分化潜能的胎盘脐带血人体细胞干细胞。中国生物医学工程学报,2004,22 (2):444 - 444
关勇等(2003)急性髓性白血病(AML)患者静止原始白血病祖细胞的检测、分离和刺激。中华医学杂志(8):342 - 349
Bartolovic K et al. (2004)伊马替尼对体外正常祖细胞的抑制作用。中国医学杂志(2):523-529
Stier S等人(2003)体外靶向p21Cip1/Waf1允许人类造血干细胞的相对扩增。中国医学杂志(4):1260-1266
Danet G等人(2003)缺氧条件下人类scid再生细胞的扩增。中国临床医学杂志[J] . 32 (1): 1 - 4
迪比达尔等人(2003)人重组造血干细胞在活跃的细胞循环中上调Fas表达,但对Fas诱导的抑制仍有抵抗力。中国检验医学杂志(1):118-126
Punzel M et al. (2003)人造血祖细胞初始分裂的对称性仅受细胞微环境的影响。实验血液学31(4):339-347
Murdoch B et al. (2003)Wnt-5A增强了人造血干细胞在体内的再生能力和原始造血发育。中国科学院学报,100(6):3422-3427
Kootstra N等人(2003)取消猴细胞中基于hiv -1的慢病毒载体转导的入境后限制。科学通报,2006 (3):1298-1303
Bhatia M et al. (1998)一类新发现的具有scid再生活性的人造血细胞。中华医学杂志(9):1038-1045
迪比达尔等人(2003)人重组造血干细胞在活跃的细胞循环中上调Fas表达,但对Fas诱导的抑制仍有抵抗力。中国检验医学杂志(1):118-126
小鼠造血细胞培养
Zimmer S等人(2011)小鼠Crebbp单倍性不足会改变骨髓微环境,导致干细胞丢失和骨髓生成过度。血
lyperi S et al. (2010)抑制破骨细胞功能可减少体内造血干细胞数量。中国医学杂志(5):1540-1549
Ohno Y et al. (2010)Hoxb4的转导下调了Geminin蛋白,为造血干细胞和祖细胞提供了增殖潜能。国家科学基金委
Ohmori et al. (2010)血毒蛋白是造血干细胞再生所必需的,独立于整合素的功能。中国生物医学工程学报,2011,31 (4):444 - 444
张强等(2010)Fancd2-/-小鼠有造血缺陷,可通过白藜芦醇部分纠正。血
Sumitomo A等人(2010)基质细胞中转录介质亚基MED1/TRAP220通过骨桥蛋白表达参与造血干细胞/祖细胞支持Mol细胞生物学
潘伟迪等人(2006)持续接触尼古丁会导致脾髓外造血。中国生物医学工程学报(英文版)
李玉等(2006)CCAAT/增强子结合蛋白α和epsilon在治疗中与全反式维甲酸合作,但其抗白血病活性不同。中国医学杂志(7):2416-2419
Carella C等(2006)ETS因子TEL2是一种造血癌蛋白。中国医学杂志(3):1128 - 1128
Carmen M等人(2004)白细胞介素-6缺乏影响骨髓基质前体,导致造血支持缺陷。中华医学杂志(9):3349-3354
Lacout C等人(2003)造血干细胞迁移的缺陷解释了Wiskott-Aldrich综合征携带者的非随机x染色体失活。中国医学杂志(4):1282-1289
Truong B等(2003)CCAAT/增强子结合蛋白抑制急性髓系白血病的白血病表型。中华医学杂志(3):1145 - 1145
金海等(2002)间充质干细胞脑内移植治疗酸性鞘磷脂酶缺陷小鼠可延缓神经异常的发生,延长其寿命。中华临床医学杂志,2009 (9):1183-1191
Samper E et al. (2002)端粒酶缺陷小鼠造血干细胞的长期再生能力。中华医学杂志(8):2767-2775
Iversen P等人(2002)充血性心力衰竭小鼠骨髓造血功能降低。[J] .中国生物医学工程学报,2016,31 (1):464 - 467
Jasinski M等人(2001)GATA1-Cre介导红/巨核细胞谱系中的Piga基因失活,并导致循环红细胞部分缺乏糖基磷脂酰肌醇相关蛋白(突发性夜间血红蛋白尿II型细胞)。中华医学杂志,32 (7):1248 - 1255
lyperi S et al. (2010)抑制破骨细胞功能可减少体内造血干细胞数量。中国医学杂志(5):1540-1549
Ohno Y et al. (2010)Hoxb4的转导下调了Geminin蛋白,为造血干细胞和祖细胞提供了增殖潜能。国家科学基金委
Ohmori et al. (2010)血毒蛋白是造血干细胞再生所必需的,独立于整合素的功能。中国生物医学工程学报,2011,31 (4):444 - 444
张强等(2010)Fancd2-/-小鼠有造血缺陷,可通过白藜芦醇部分纠正。血
Sumitomo A等人(2010)基质细胞中转录介质亚基MED1/TRAP220通过骨桥蛋白表达参与造血干细胞/祖细胞支持Mol细胞生物学
潘伟迪等人(2006)持续接触尼古丁会导致脾髓外造血。中国生物医学工程学报(英文版)
李玉等(2006)CCAAT/增强子结合蛋白α和epsilon在治疗中与全反式维甲酸合作,但其抗白血病活性不同。中国医学杂志(7):2416-2419
Carella C等(2006)ETS因子TEL2是一种造血癌蛋白。中国医学杂志(3):1128 - 1128
Carmen M等人(2004)白细胞介素-6缺乏影响骨髓基质前体,导致造血支持缺陷。中华医学杂志(9):3349-3354
Lacout C等人(2003)造血干细胞迁移的缺陷解释了Wiskott-Aldrich综合征携带者的非随机x染色体失活。中国医学杂志(4):1282-1289
Truong B等(2003)CCAAT/增强子结合蛋白抑制急性髓系白血病的白血病表型。中华医学杂志(3):1145 - 1145
金海等(2002)间充质干细胞脑内移植治疗酸性鞘磷脂酶缺陷小鼠可延缓神经异常的发生,延长其寿命。中华临床医学杂志,2009 (9):1183-1191
Samper E et al. (2002)端粒酶缺陷小鼠造血干细胞的长期再生能力。中华医学杂志(8):2767-2775
Iversen P等人(2002)充血性心力衰竭小鼠骨髓造血功能降低。[J] .中国生物医学工程学报,2016,31 (1):464 - 467
Jasinski M等人(2001)GATA1-Cre介导红/巨核细胞谱系中的Piga基因失活,并导致循环红细胞部分缺乏糖基磷脂酰肌醇相关蛋白(突发性夜间血红蛋白尿II型细胞)。中华医学杂志,32 (7):1248 - 1255
其他的用途
人NK细胞培养
Keskin D等人(2007)TGFbeta促进CD16+外周血NK细胞转化为CD16- NK细胞,与蜕膜NK细胞相似。自然科学进展,34 (9):378- 383
陈旭等(2006)cd28刺激的ERK2磷酸化是YTS NK细胞微管组织中心和颗粒极化所必需的。科学通报,30 (3):346- 351
Vieillard V et al. (2005)HIV-1感染期间NK细胞对CD4+ T细胞的细胞毒性:gp41肽诱导NKp44配体的表达自然科学进展,32 (3):10981-10986
Baumann B et al. (2004)猪内皮细胞缺乏半乳糖- α -1,3-半乳糖表达可阻止补体诱导的裂解,但不能阻止直接的异种NK细胞毒性。中国生物医学工程学报,2004,21 (3):444 - 444
Perez S et al. (2003)人脐带血中一种新的髓样NK细胞祖细胞。血液学杂志(9):3444-3450
陈旭等(2006)cd28刺激的ERK2磷酸化是YTS NK细胞微管组织中心和颗粒极化所必需的。科学通报,30 (3):346- 351
Vieillard V et al. (2005)HIV-1感染期间NK细胞对CD4+ T细胞的细胞毒性:gp41肽诱导NKp44配体的表达自然科学进展,32 (3):10981-10986
Baumann B et al. (2004)猪内皮细胞缺乏半乳糖- α -1,3-半乳糖表达可阻止补体诱导的裂解,但不能阻止直接的异种NK细胞毒性。中国生物医学工程学报,2004,21 (3):444 - 444
Perez S et al. (2003)人脐带血中一种新的髓样NK细胞祖细胞。血液学杂志(9):3444-3450
人间充质细胞培养
陈旭等(2006)人成体骨髓间充质干细胞的生物反应器扩增。中国生物医学工程学报(英文版)
Chagraoui J等人(2003)胎儿肝间质由上皮细胞向间质细胞转化而成。中华医学杂志(8):2973-2982
Baksh D等人(2003)成人骨髓源性间充质祖细胞具有不依赖粘附存活和扩增的能力。实验血液学31(8):723-732
Chagraoui J等人(2003)胎儿肝间质由上皮细胞向间质细胞转化而成。中华医学杂志(8):2973-2982
Baksh D等人(2003)成人骨髓源性间充质祖细胞具有不依赖粘附存活和扩增的能力。实验血液学31(8):723-732
参考文献
- 德克斯特等人(1977)体外控制造血干细胞增殖的条件。中国生物医学工程学报,2011 (3):344 - 344
- Gartner S等人(1980)人骨髓细胞的长期培养。自然科学进展,37 (8):479 - 479
- 萨瑟兰等人(1990)在支持骨髓间质层上限制稀释培养的单个人造血干细胞的功能表征。科学通报,87(9):394 - 398