在集落形成单位(CFU)测定中检测和量化造血祖细胞

MethoCult™是一种以半固体甲基纤维素为基础的培养基,用于促进培养中的造血祖细胞的最佳生长和分化。MethoCult™是体外检测和定量血液中造血祖细胞的“金标准”菌落形成单位(CFU)或细胞(CFC)测定,也称为甲基纤维素测定。广泛的MethoCult™培养基配方可用于人类和小鼠组织造血细胞的CFU测定。某些配方也可用于来自人类多能干细胞(hPSCs)或其他物种(特别是大鼠、非人类灵长类动物和狗)的造血细胞。

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为什么使用MethoCult™介质?

  • 使用精心筛选的成分制备。
  • 严格的性能测试,确保卓越的批次对批次再现性。
  • 可提供即用制剂,用于鉴定和枚举总cfu,红细胞(CFU-E和BFU-E),粒细胞/巨噬细胞(CFU-GM, CFU-G和CFU-M)和多谱系(cfu - gem)祖细胞。
  • 也可在配方,允许研究人员添加组件的选择。定制配方和尺寸可根据要求提供。

MethoCult™人造血细胞培养基配方

血清

格式:

  • 80-100毫升瓶
  • 3ml × 24管

包含血清:

包含细胞因子:

可添加或不添加重组细胞因子

组织:

  • 脐带血
  • 骨髓
  • 外周血
  • Leukapheresis产品
  • 纯化或培养的造血干细胞

应用程序:

  • 脐带血库快速CFU检测
  • 经典-历史协议的原始配方
  • 骨髓集落亚型的最佳改进区分
  • 富集-用于纯化或培养的HSPCs, LTC-IC检测
  • 支持髓系(CFU-G/M/GM)、混合型(CFU-GEMM)和/或红系(CFU-E/BFU-E)菌落的生长

特点:

  • 配方有或没有EPO
  • 与STEMvision™仪器兼容,用于CFU检测的自动和标准化计数
  • 提供熟练程度测试

无血清

格式:

80-100毫升瓶

包含血清:

包含细胞因子:

可添加或不添加重组细胞因子

组织:

  • 脐带血
  • 骨髓
  • 外周血
  • Leukapheresis产品
  • 纯化或培养的造血干细胞
  • hPSC-derived细胞

应用程序:

  • 当需要确定成分的培养基时进行测定
  • 支持骨髓(CFU-G/M/GM)菌落的生长,无论是否存在混合(CFU-GEMM)菌落

特点:

  • 完全无血清和明确
  • 有或没有EPO或其他细胞因子

使用条件培养基

格式:

  • 100毫升一瓶

包含血清:

包含细胞因子:

含或不含重组EPO的条件培养基

组织:

  • 脐带血
  • 骨髓
  • 外周血
  • Leukapheresis产品
  • 纯化或培养的造血干细胞

应用程序:

  • 使用琼脂-白细胞条件培养基(琼脂- lcm)作为集落刺激因子来源的试验
  • 支持髓系(CFU-G/M/GM)、混合型(CFU-GEMM)和/或红系(CFU-E/BFU-E)菌落的生长

特点:

  • 含有血清和补品
  • 配方有或没有EPO

基甲基纤维素

格式:

40毫升一瓶

包含血清:

包含细胞因子:

组织:

  • 脐带血
  • 骨髓
  • 外周血
  • Leukapheresis产品
  • 纯化或培养的造血干细胞

应用程序:

无血清,无细胞因子制剂适用于检测血清或细胞因子

特点:

  • 完全灵活地添加单个细胞因子和补充剂
  • 基础甲基纤维素2.6%原液在Iscove 's MDM中
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不确定哪种MethoCult™配方适合您?

为了在CFU试验中实现稳健的菌落生长,最优的MethoCult™配方将取决于您的起始细胞来源。使用我们的交互式产品查找器来确定哪种配方最适合您的实验,并为您的CFU检测生成完整的材料列表。

使用交互式产品查找器>

用于小鼠造血细胞和从其他物种分离的细胞的MethoCult™培养基配方

血清

MethoCult™ Serum-Containing

格式:

  • 90毫升或100毫升的瓶子
  • 3ml × 24管

包含血清:

包含细胞因子:

可添加或不添加重组细胞因子

组织:

  • 骨髓
  • 外周血
  • 胎儿肝脏

应用程序:

支持骨髓(CFU-G/M/GM)、混合(CFU-GEMM)和/或红细胞(CFU-E/BFU-E)祖细胞的克隆生长

特点:

  • 含或不含EPO的配方
  • 选择与STEMvision™仪器兼容的制剂,用于CFU检测的自动和标准化计数

无血清

MethoCult™ Serum-Free

格式:

100毫升一瓶

包含血清:

包含细胞因子:

加入重组细胞因子

组织:

  • 骨髓
  • 外周血
  • 胎儿肝脏

应用程序:

支持红细胞(BFU-E)祖细胞的克隆生长

特点:

  • 用EPO配制
  • 与STEMvision™仪器兼容,用于CFU检测的自动和标准化计数

基甲基纤维素

MethoCult™ Base Methylcellulose

格式:

80毫升或40毫升的瓶子

包含血清:

包含细胞因子:

组织:

  • 骨髓
  • 外周血
  • 胎儿肝脏

应用程序:

无血清,无细胞因子制剂适用于检测血清或细胞因子

特点:

  • 完全灵活地添加单个细胞因子和补充剂
  • 基础甲基纤维素2.6%原液在Iscove 's MDM中

其他物种

格式:

100毫升一瓶

包含血清:

包含细胞因子:

加入重组细胞因子

组织:

  • 大鼠骨髓
  • 非人灵长类动物的骨髓、外周血和纯化的造血干细胞

应用程序:

  • 大鼠骨髓(CFU-GM/G/M)或红细胞(CFU-E/BFU-E)祖细胞的定量
  • 非人类灵长类动物髓系(CFU-GM),混合(CFU-GEMM)和/或红细胞(CFU-E/BFU-E)祖细胞的定量

特点:

  • 大鼠GF R3774配方被优化用于检测大鼠粒细胞/巨噬细胞祖细胞
  • 小鼠SF M3436制剂适用于大鼠红细胞祖细胞的生长和计数
  • 许多人类经典,优化和丰富的配方适用于非人类灵长类动物样本
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数据

Human Cord Blood Colonies Plated in MethoCult™ Optimum H4034, Imaged on STEMvision™ Instrument

图1所示。人类脐带血菌落镀MethoCult™Optimum H4034,影像来源:STEMvision™工具

Mouse Bone Marrow Colonies Plated in MethoCult™ GF M3434, Imaged on STEMvision™ Instrument

图2。小鼠骨髓菌落镀于MethoCult™GF M3434,影像来源:STEMvision™工具


STEMvision™ CFU Counting Instrument

自动化和标准化CFU化验计数

使用STEMvision™(一种用于自动成像和计数造血菌落的台式仪器和计算机系统)确保准确和可重复的CFU检测结果。

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品牌的历史

STEMCELL和MethoCult™都是从培养基制备服务发展而来的特里·福克斯实验室为不列颠哥伦比亚省癌症机构的血液学/肿瘤学研究工作。现在20多年过去了,MethoCult™是发表最多的甲基纤维素基培养基,用于造血CFU检测。

CFU检测资源

探索我们的资源信息和支持,建立,优化和标准化CFU分析。


关键应用及相关刊物

研究内源性和外源性调节因子对正常造血祖细胞增殖和分化的影响

申杰等(2014)高c-Kit表达可识别自我更新受损和巨核细胞偏向的造血干细胞。中华检验医学杂志,2011,31 (2):557 - 557
Zimdahl B等人(2014)Lis1调节造血干细胞和白血病的不对称分裂。生态学报,46(3):245-52
Baker S等人(2014)B-myb是造血干细胞和骨髓祖细胞发育的重要调节因子。科学通报,31 (8):322 - 322

内源性和外源性调节因子对恶性造血祖细胞增殖和分化影响的研究

低温保存、细胞处理和体外操作程序的质量控制

体外检测造血祖细胞对药物开发候选疗法的敏感性

评价诱导多能干细胞的造血分化

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