图1所示。BrainPhys™神经元介质NeuroCult™SM1神经元补充剂支持比其他市售的培养系统更高的神经活动

用葡萄糖补充的* BrainPhys™和NeuroCult SM1神经元补充剂或其他市售的培养系统（含其推荐的补充剂）培养原代E18大鼠皮质神经元8周。使用BrainPhys™，神经元活性可在第9天通过多电极阵列（MEA）检测到，而在其他市售培养基中添加推荐的补充剂，直到第14天才能检测到活性。在商业培养基条件下，一种广泛使用的商业神经元培养基，在整个培养期间平均放电率保持较低。相比之下，在商业介质“Plus”条件下观察到“峰降”活动模式，平均发射率在2天内迅速增加，随后在接下来的2 - 4天内活动下降。含15mm葡萄糖的BrainPhys™和SM1 Kit在整个8周的培养期间保持最高水平的活性。

图2。在BrainPhys™神经元培养基中成熟的hpsc来源的神经元显示出改善的兴奋性和抑制性突触活性

神经祖细胞（npc）是在基于胚状体的方案中使用STEMdiff™神经诱导培养基从H9细胞中生成的。接下来，npc在（A，C） BrainPhys™神经元培养基中体外培养44天，培养基中添加2% NeuroCult™SM1补充剂，1% N2补充剂-A， 20 ng/mL GDNF, 20 ng/mL BDNF， 1 mM db-cAMP和200 nM抗坏血酸以启动神经元分化，或（B，D）在相同的补充条件下添加DMEM/F-12。（A，C）在BrainPhys™神经元培养基中成熟的神经元表现为自发兴奋(ampa介导；A)和抑制性(gaba介导；C)电压钳形电生理的突触事件。与在DMEM/F-12中成熟的神经元相比，在BrainPhys™neuronal Medium中成熟的神经元培养物中，自发突触事件的频率和幅度始终更高（B，D）。痕迹具有代表性。

图3。BrainPhys™无缝集成到各种神经元细胞类型的2D神经工作流程

BrainPhys™可用于hPSC和啮齿动物神经元培养工作流程的关键阶段。对于hpsc衍生的神经元模型，用于生成四种神经元细胞类型（运动，感觉，前脑和中脑）的标准化STEMdiff™培养基试剂盒依赖于基于BrainPhys™的成熟，而可以由STEMdiff™试剂盒生成的两种胶质细胞亚型（星形胶质细胞和小胶质细胞）与基于BrainPhys™的共培养系统兼容。或者，hpsc衍生的神经元可以使用包含BrainPhys™的DIY协议生成，如上所示。此外，BrainPhys™还支持下游应用，包括长期培养和表征分析。对于初级啮齿动物模型系统，神经元培养可以使用标准化的BrainPhys™初级神经元试剂盒或者一个包含BrainPhys™的DIY协议，然后是用于下游应用的BrainPhys™。

BrainPhys™Neuronal Medium非常适合短期3D神经元应用，如神经类器官的电记录(图4)，也可以用于长期的神经类器官成熟。可能需要额外补充，并应根据需要进行优化。

图4。STEMdiff™脊髓类器官在BrainPhys™成熟时显示出增加的电生理活动

BrainPhys™被纳入标准化的脊髓类器官工作流程（目录#100-1524），将类器官从STEMdiff™脊髓分化培养基过渡到BrainPhys™补充STEMdiff™神经类器官补充a，每2 - 3天更换一次培养基。与STEMdiff™Neural Organoid Maintenance Kit Medium（目录#100-0120）中成熟的脊髓类器官相比，在BrainPhys™Neuronal Medium + STEMdiff™Neural Organoid Supplement A中成熟的脊髓类器官通过MEA测量显示出更高的电生理活性，具有增加的峰值，活性电极，加权平均放电率（WMFR），爆发次数和频率以及同步指数。数据采用正态分布（D 'Agostino & Pearson检验），采用配对t检验(n = 3个细胞系，1 - 3个技术重复；* p≤0.05,** p≤0.01)。