从小鼠健康组织和肿瘤中分离CD45+细胞

说起CD45，相信大家都不陌生，它是一种存在于所有的有核造血细胞表面的I型跨膜分子，由于其在不同小鼠品系的免疫细胞（即白细胞）上能够高水平表达，因此成为了分选小鼠免疫细胞的理想标志物。在特定组织微环境中发现的免疫细胞也称为组织驻留免疫细胞 (TRIC)，是基础研究、药物筛选、临床前动物研究、肿瘤模型等的重要细胞来源。然而，分离TRIC具有一定的挑战性，因为在组织解离后存在非免疫和组织来源的细胞及细胞碎片。这一常见的问题将导致白细胞的起始含量较低，从而延长细胞分选的时间并干扰识别一些数量少但关键的白细胞亚群。

根据CD45+的表达分选细胞也是获得肿瘤浸润细胞的常用方法。这些肿瘤浸润白细胞 (TIL) 对于研究肿瘤模型或进行药物筛选、细胞培养或单细胞分析等下游应用的研究非常重要。 然而，由于TIL的含量相对较低，以及肿瘤样本中组织碎片的异质性和丰富性，分离和分析TIL具有一定的困难。

为了克服与CD45+免疫细胞分选相关的难题，STEMCELL研发了两种简单、快速的小鼠CD45+无柱免疫磁珠分选试剂盒，使用EasySep™可在短短18分钟内富集CD45+免疫细胞。此外，EasySep™可以富集或去除多种小鼠组织中的CD45+白细胞，同时保留细胞功能。本期文章将介绍和总结EasySep™ CD45+分选试剂盒使用过程中的关键注意事项，希望对您的研究有所帮助。

应该使用哪种EasySep™试剂盒从小鼠组织中获取CD45+细胞？

我们目前提供两种针对小鼠CD45抗原的EasySep™正选试剂盒：

选择哪款试剂盒取决于几个关键的考虑因素，如样本类型（健康组织与肿瘤组织）、CD45+ 细胞的起始含量（高，> 30%与低， < 30%）、靶细胞获得的方式（去除与分选），请参阅表1具体了解两个试剂盒之间的差异。

什么时候应该使用EasySep™小鼠TIL (CD45) 正选试剂盒？

建议使用EasySep™小鼠TIL (CD45) 正选试剂盒从实体小鼠肿瘤或组织样本中分离白细胞，这些样本中的CD45⁺细胞的起始含量较低 (< 30%)，从而能得到更好的结果。在某些情况下，由于小鼠肿瘤的异质性和一些特定下游应用，实验方案可能需要优化，请参阅产品信息表) 第3-4页了解更多详情。

什么时候应该使用EasySep™小鼠CD45正选试剂盒？

建议使用EasySep™小鼠CD45正选试剂盒从健康组织（例如小鼠脾和肺）或CD45⁺细胞起始含量较高（> 30%）的组织中分离白细胞。若将该试剂盒用于其他组织可能需要优化，请联系 info.cn@stemcell.com 了解更多信息。

当使用EasySep™小鼠CD45正选试剂盒处理CD45⁺细胞起始含量较低（< 30%）并富含细胞碎片的组织时，可以应用以下方法进行优化：

• 使用适当的密度梯度离心液去除细胞碎片
• 滴定抗体混合物
• 增加分选次数