GloCell™固定式活性染料
通过排除死细胞来提高流式细胞术数据的准确性
GloCell™Fixable Viability dye是用于活/死哺乳动物细胞染色的荧光胺标记染料,允许从流式细胞术数据中明确排除死细胞。GloCell™染料还可用于在荧光显微镜下从死细胞中视觉区分活细胞,并与细胞内抗体染色方案兼容。
为什么在流式细胞术中排除死细胞很重要?
在细胞凋亡的早期阶段,非活细胞开始失去其结构完整性并变得越来越具有渗透性。来自流式细胞术检测的抗体可以穿过受损的细胞膜,非特异性地与死细胞结合,导致假阳性结果并降低数据质量。死细胞也比活细胞有更大的自身荧光,这使得很难确定罕见的细胞群或弱阳性标记物。虽然门控可以大致区分活细胞群和死细胞群,但仅根据散射模式分析很难完全排除所有死细胞。这些问题可以通过在流式细胞术中使用活细胞/死细胞染色染料来缓解。
GloCell™染料是如何工作的?
GloCell™固定活性染料是活细胞/死细胞染色染料,不可逆地结合细胞表面和细胞内胺基。对于活细胞,GloCell™染料不能穿过完整的细胞膜,只能染色细胞表面存在的少数胺基。相反,死细胞受损的细胞膜允许GloCell™染料接触到更多的细胞内胺基,从而产生比活细胞更高的荧光。荧光强度的差异使用户能够清楚地区分活细胞和死细胞群,确保可靠的流式细胞术结果和分析。

图1所示。活/死细胞染色用GloCell™固定式活性染料
(A)在死细胞中,GloCell™染料与细胞表面和细胞内胺基结合。(B)在活细胞中,GloCell™染料仅与细胞表面胺基结合。(C)活的和死的外周血单个核细胞用GloCell™固定活力染料紫510(目录# 75010)。
为什么使用可固定活性染料?
用可固定活性染料标记的细胞即使在固定、渗透和洗涤后也能保持荧光强度。这使得在固定样品后,活细胞和死细胞的鉴定和评估变得容易。

图2。用GloCell™可固定活性染料染色的非固定和固定细胞中荧光信号的保存
用活的和死的(在95°C热休克30分钟)WLS-1C人诱导多能干细胞(iPS)的混合物染色GloCell™固定活力染料紫450(目录#75009)在4%多聚甲醛中固定或不固定。染色后立即流式细胞术分析(A)未固定细胞和(B)固定细胞。
为什么使用GloCell™染料?
- 多才多艺的。可在广泛的激发和发射波长范围。可用于荧光显微镜,流式细胞术,和细胞内抗体染色方案。
- 稳定。耐固定、渗透性和洗涤。
- 兼容的。经验证可与我们的EasySep™和RosetteSep™细胞分离产品一起使用。