产品号 #06010
建立和维持培养人肠道类器官
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实验方案所需材料
欲了解该实验方案所需的所有产品，请咨询 实验方案和文档。
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温和的细胞解离试剂 -
含有 15 mM HEPES 的 DMEM/F-12 -
D-PBS（不含 Ca++ 和 Mg++） -
Y-27632
我们的产品专家怎么说
类器官扩展了体外研究肠上皮的可能性。 通过提供优化的培养基和稳健、易操作的方案，研究人员更容易使用这些技术。
Ryan Conder胃肠生物学副主任
概述
通过这种完整的培养基配方和优化方案建立和培养的肠类器官对成人肠上皮的关键特征进行建模。 使用易于遵循且稳健的方案，您可以在一周内从人肠隐窝中获得类器官； 丰富的干细胞群可以实现供体样本中类器官的生长，包括那些难以生长的样本。
在 IntestiCult™ 类器官生长培养基（人）中生长的类器官包含由极化肠上皮细胞层封闭的功能腔，对于多功能建模应用，可以进一步使用 IntestiCult™ 类器官分化培养基（产品号 #100-0214）分化为单层或气液界面 (ALI) 中3D 或 2D 的结构。
肠道类器官培养的应用包括研究肠上皮的发育和功能、肠道疾病建模以及在肠道模型中筛选分子的功效和毒性。 肠类器官培养物还可用于研究成体干细胞特性和再生治疗方法。
在我们的肠道主题课程中了解如何培养人类肠道类器官，或浏览有关使用 IntestiCult™ 类器官工作流程的常见问题 (FAQ)。
如果您打算将此产品用于商业目的，请通过 www.huborganoids.nl 联系 HUB 以获得商业使用许可证或有关 HUB 许可的说明。
子类型
专业培养基
细胞类型
肠细胞
物种
人
应用
分化, 扩增, 类器官培养, 细胞培养, 维持培养
品牌
IntestiCult
感兴趣的领域
上皮细胞生物学, 干细胞生物学, 疾病模型, 药物发现和毒性测试
实验数据
图 1. 在 IntestiCult™ 类器官生长培养基（人）中生长的初级类器官在培养 10-14 天后完全成熟
从人类结肠活检样本中分离出来细胞，并在 IntestiCult 类器官生长培养基（人）中生成原代类器官。 (A) 两天 (B) 六天 (C) 八天和 (D) 十天生长后对类器官进行成像分析。
图 2. 在 IntestiCult™ 类器官生长培养基（人）中生长的类器官显示人肠上皮细胞的标记
在 IntestiCult™ 类器官生长培养基（人）中生长的类器官的免疫荧光显示 (A) DAPI (B) EPCAM 和 (C) Ki67 的标记。 (D) 合并图像显示上皮细胞层（EPCAM+）内活跃增殖的 (Ki67+) 肠干细胞。
图 3. Forskolin 诱导 IntestiCult™ 类器官生长培养基（人）中生长的类器官肿胀
用 (A) 5 μM Forskolin 或 (B) DMSO 处理类器官，并在 0 分钟和 120 分钟时测量类器官面积。 (C) 经 Forskolin 处理的类器官大小增加了 33.5 ± 3.8%，而经 DMSO 处理的类器官大小增加了 7.5 ± 0.8%。
图 4. IntestiCult™ 类器官生长培养基（人）支持多种细胞外基质中类器官的生长
肠类器官培养物在 IntestiCult™ 类器官生长培养基（人）中制备，并铺板在 (A) Matrigel® 生长因子减少的基底膜基质（Corning® 产品号 # 356231）、(B) Geltrex® 不含 LDEV 的减少生长因子的基底膜中（Gibco™ 产品号 # A1413202）、(C) Cultrex® 低生长因子基底膜提取物，1 型（R&D Systems™ 产品号 # 3433-005-R1）和 (D) Cultrex® 低生长因子基底膜提取物 ， 2 型（R&D Systems™ 产品号 3533-005-02）。 类器官培养物在第 4 代结束时成像。所有四种细胞外基质均支持人肠道类器官的强劲生长。 比例尺 = 250 μm。
实验方案和文档
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文件类型
产品名称
产品号 #
批次 #
语言
资源和文献
技术资源(53)
法律声明：
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