半固体甲基纤维素细胞培养培养基的制备与平板培养

甲基纤维素培养基是一种半固体培养基，可用于培养造血干细胞和祖细胞进行集落形成试验，也可用于培养杂交瘤和中国仓鼠卵巢细胞进行细胞系发育。本规程提供了用半固体甲基纤维素培养基制备培养基用于下游细胞培养的说明。

材料

• 半固体甲基纤维素培养基(如：MethoCult™或ClonaCell™)
• 钝头针(例如，16规的钝头针；目录# 28110)
• 注射器(例如3cc注射器；目录# 28230)
• 培养皿(如35mm培养皿；目录# 27100)

协议

1. 半固体甲基纤维素介质，如MethoCult™或ClonaCell™，必须在使用前彻底混合，以确保混合物均匀，并为您的分析获得最佳结果。为了混合，大力摇动瓶子至少一分钟。你会看到介质变得不透明，充满了气泡。
   
   
   请注意如果需要，先加入细胞因子或其他所需的补充剂，然后彻底摇匀。
2. 等待10 - 15分钟让气泡消散。
3. 用钝端针头和注射器将培养基分装到工作体积中。
   
   
   请注意：不要使用移液器对甲基纤维素培养基进行分馏。甲基纤维素介质是粘性的，会粘在移液器内部，导致分配体积不准确。
4. 加入适量的浓缩单细胞悬液。
5. 用力摇晃至少一分钟。
   
   
   请注意对于较小的等分，用旋涡搅拌约4秒。
6. 等待气泡消散。
7. 用钝端针头和注射器将样品镀板。