如何减少血小板污染

血小板（凝血细胞）是一群体积小且形状不规则的透明细胞碎片，由巨核细胞生成，对于正常的血液凝固起关键作用。血小板本身比较粘稠，被激活之后，很容易附着在其他粘性细胞上（例如单核细胞，嗜酸性粒細胞等），从而产生细胞团块。

为了避免激活血小板，因此对含有血小板的样本要小心且温和地采集和处理。下面为您提供几个实用的方法¹。

• 抽血时，使用粗针头（例如19G），并且避免用力抽动柱塞。
• 抽血时使用较多的抗凝血剂 （例如使用ACD管采集血液）
• 血样不要以涡旋震荡混匀
• 使用不含钙离子和镁离子的缓冲液以避免激活血小板

下面的步骤也可以帮助减少从新鲜全血制备的单个核细胞悬液中的血小板污染：

1. 当使用密度梯度离心法（例如Lymphoprep™ or Ficoll™）分离单个核细胞时，避免吸取含有大量血小板的血浆层。
2. 在下一步洗涤分离出的单个核细胞时：
1. 使用低速离心（120 X g，10分钟，关闭离心刹车，室温）
2. 小心弃置含有大量血小板的上清液
3. 在新的缓冲液中重悬细胞沉淀（使用干净的移液枪枪头）
4. 以上步骤至少重复两次（总共三次或更多的洗涤）

¹. Lim, K. G. and Weller, P. F. 2001. Isolation of Human Eosinophils. Current Protocols in Immunology. 7.31.1-7.31.7.