用于人ES和iPSC细胞的稳定的、无饲养层的cGMP维持培养基。
用于人ES和iPSC细胞的稳定的、无饲养层的cGMP维持培养基。
创新是 STEMCELL 的核心价值。 mTeSR™ Plus 的上市反映了这一点以及我们为下一代多能干细胞研究人员服务的愿望。
使用这种稳定的、无饲养层的人多能干细胞 (hPSC) 维持培养基，享受周末无需换液的自由和增强的生长特性，同时保持细胞质量。
mTeSR™ Plus 根据相关 cGMP 制造，确保基础研究以及细胞治疗和新药研究应用的最高质量和一致性。 它基于 mTeSR™1（产品号 #85850），这是发布最广泛的 hPSC 无饲养层细胞培养基。 凭借稳定的关键培养基成分（包括 FGF2）和增强的 pH 缓冲体系，您可以使用 mTeSR™ Plus 来维持细胞质量，并通过每日补料或限制补料提高细胞扩增率。 每批 mTeSR™ Plus 5X 添加物均用于制备完整的 mTeSR™ Plus 培养基，然后使用人多能干细胞 (hPSC) 在培养测定中进行性能测试。
mTeSR™ Plus 与多种培养基质兼容，包括 Corning® Matrigel® hESC 基质和 Vitronectin XF™（产品号 #07180，由 Nucleus Biologics 开发和制造）。
如需更多质量信息，请访问 www.stemcell.com/compliance.
要申请 mTeSR™ Plus 的 FDA 主文件授权书 (LOA)，点击这里.
子类型
专业培养基
细胞类型
多能干细胞
物种
人
应用
扩增, 细胞培养, 维持培养
品牌
TeSR
研究领域
干细胞生物学, 疾病模型, 药物发现和毒性测试
配方类别
无血清
图 1. mTeSR™ Plus 在整个灵活换液方案中保持最佳 pH 水平
在相似细胞密度下，在 mTeSR™ Plus 中培养的 hPSC 所用的培养基的 pH 值高于在 mTeSR™1 和其他灵活补料培养基中培养的 hPSC。 72 小时不补液后测量 pH 值和细胞数量。显示的细胞数量范围代表在整个典型传代中观察到的不同密度。 这表明，在日常维持培养过程中，使用 mTeSR™ Plus 可以随时跳过两天的补液，同时保持pH值高于7.0。 注意：在 72 小时之前，所有培养基中均未补液，培养物的补液量是标准培养基体积的两倍，细胞数来自 6 孔板的一个孔。
图 2. mTeSR™ Plus 在整个灵活换液方案中保持一致的 FGF2 水平
在 37°C 下培养 72 小时后，mTeSR™ Plus 中的 FGF2 水平仍保持较高水平。 通过ELISA测量。
图 3. mTeSR™ Plus 支持更高的细胞数量
人 ES (H9) 细胞在 Corning® Matrigel® 基质上的 mTeSR™1 或 mTeSR™ Plus 中培养 7 天以上，每日补液或限制补液，获得了生长曲线。 通过每孔接种 20,000 个细胞来确定生长曲线6 孔板作为聚集体，每天在双孔中计数细胞数。
图 4. 在 mTeSR™ Plus 培养物中观察到较大的克隆
测量在 mTeSR™1（每日补液）或 mTeSR™ Plus（限制补液）中培养的人 ES（H1、H9）和 iPS（STiPS-M001、WLS-1C）传代超过 10 次的每次传代的平均克隆大小 (± SEM) 。 测量收获细胞的代表性克隆直径。 请注意，该数据代表以 7 天间隔传代的培养物； 如果使用较短的传代间隔，则预期克隆大小会较小。
图 5. 在 mTeSR™ Plus 培养物中观察到正常人类 ES 和 iPS 细胞形态
图示为在 Corning®️ Matrigel®️ 基质上培养的未分化人 hES (H1) 和 iPS (WLS-1C) 细胞，每日补液 mTeSR™1 或限制补液 mTeSR™ Plus。 10 代后细胞保留突出的核仁和高核质比。 当细胞准备传代时，密集的细胞和多层结构非常明显。
图 6. 在限制补液的 mTeSR™ Plus 培养基中培养的细胞表达未分化的细胞标记
使用流式细胞术对人 ES（H1、H9）和 iPS（WLS-1C、STiPS-M001）细胞进行未分化细胞标记物（A）OCT3/4 和（B）TRA-1-60 的表征。 图表显示mTeSR™1（每日补液）或 mTeSR™ Plus（限制补液）中每5代重复孔分析最多 10-15 代的平均表达结果。
图 7. 在限制补液的 mTeSR™ Plus 中维持的细胞与在 mTeSR™1 中维持的细胞具有相当的分化效率
人 ES（H1、H9）和 iPS（WLS-1C、STiPS-M001）细胞保存在 mTeSR™1（每日补液）或 mTeSR™ Plus（限制补液）中。 使用定向分化方案分化细胞并进行流式细胞术分析。 图表显示 4 个细胞系的平均表达 (± SEM) 结果。 用于每个胚层的流式细胞术的标记物在图示中列出。
图 8. 在限制补液的 mTeSR™ Plus 中培养的 hPSC 保持正常核型
在 mTeSR™ Plus 中培养 30 代的 (A) 人 ES (H1) 和 (B) iPS (WLS-1C) 细胞的核型图显示保留了正常核型。
图 9. 补充有 CloneR™ 的 mTeSR™ Plus 中 hPSC 的高克隆效率
将 hPSC（H1、H9、WLS-1C 和 STiPS-M001）培养在带有 CloneR™ 的 mTeSR™ Plus 中，其克隆效率等于或高于带有 CloneR™ 的 mTeSR™1 中的 hPSC。 细胞以克隆密度（25 个细胞/cm²）接种在含 mTeSR™1 或 mTeSR™ Plus 的 CellAdhere™ Vitronectin™ XF™ 涂层板上。 n ≧ 3 个生物重复。
图 10. mTeSR™1 和 mTeSR™ Plus 中 RNP 电转 24 小时后的代表性细胞形态
H1-eGFP ES 细胞接种于 (A) mTeSR™1 和 (B) mTeSR™ Plus 中，并在 RNP 电转后立即补充 CloneR™。 电转后24小时拍摄图像。
图 11. mTeSR™ Plus 中形成的克隆更大，可以在更早的时间点进行挑选
在 CellAdhere™ Vitronectin™ XF™ 上添加 CloneR™ 的 (A) mTeSR™1 或 (B) mTeSR™ Plus 中以克隆密度（25 个细胞/cm²）单细胞接种后 8 天拍摄的人 ES (H9) 集落的代表性图像。
图 12. 从 mTeSR™ Plus 培养的 hPSC 生成神经祖细胞
人 ES (H9) 和 iPS (STiPS-M001) 细胞维持在 (A) mTeSR™1（每日补液）或 (B) mTeSR™ Plus（限制补液）中，并使用基于胚体 (EB) 的 STEMdiff™ 方案进行分化 SMADi 神经诱导。 神经在重新接种 EB 后，保存在 mTeSR™1 或 mTeSR™ Plus 中的 hPSC 衍生的祖细胞清晰地显示神经玫瑰花结（箭头）。
图 13. 从 mTeSR™ Plus 培养的 hPSC 生成脑类器官
使用 mTeSR™ Plus 培养人 ES (H9) 细胞，并使用 STEMdiff™ 脑类器官试剂盒将其引导至脑类器官。 图像显示顶端祖细胞标记 SOX2（紫色）和神经元标记 TBR1（绿色）。
图 14. 从 mTeSR™ Plus 培养的 hPSC 生成造血祖细胞
使用 STEMdiff™ 造血试剂盒将 mTeSR™1（每日补液）或 mTeSR™ Plus（限制补液）中培养的人 ES（H1、H9）和 iPS（STiPS-M001、WLS-1C）细胞系分化为造血祖细胞。 结束时分化期，从上清液中收获细胞并通过流式细胞术分析CD34+和CD45+的共表达。 (A) 显示 CD34+ 和 CD45+ 表达的代表性图，(B) 共表达的细胞百分比显示了 CD34+ 和 CD45+ 以及 (C) 收获的活细胞总数。 数据表示为平均值（±SEM）； n=4。
图 15. mTeSR™ Plus 培养的 hPSC 生成心肌细胞
人 ES (H9) 和 iPS (WLS-1C) 细胞保存在 mTeSR™1（每日补液）或 mTeSR™ Plus（限制补液）中，并使用 STEMdiff™ 心肌细胞分化试剂盒分化为心肌细胞。 在分化期结束时，收获细胞并通过微电极阵列（MEA）和流式细胞术进行分析。 (A) 心肌细胞的代表性 MEA 电压记录（第 20 天）显示出特征性电分布和稳定的搏动率。 (二) 百分比显示了表达 cTNT 的细胞数量和 (C) 收获的活细胞总数。 数据表示为平均值（±SEM）； n=2。
图 16. 从 mTeSR™ Plus 培养的 hPSC 生成肠类器官
使用 mTeSR™ Plus 培养人 ES (H9) 细胞，并使用 STEMdiff™ 肠类器官试剂盒将其引导至肠类器官。 图像显示肠上皮 EpCAM（绿色）和 CDX2（红色）标记以及肠间充质标记波形蛋白（白色）。 细胞核用 DAPI（蓝色）复染。
图 17. mTeSR™ Plus 培养的 hPSC 生成定形内胚层
(A) 代表性密度图，显示使用 STEMdiff™ 定形内胚层试剂盒分化 5 天后，在 mTeSR™1（每日补液）或 mTeSR™ Plus（限制补液）中培养的细胞中 CXCR4 和 SOX17 的表达。 (二)定量测量 CXCR4 和 SOX17 的共表达，对使用 mTeSR™1 或 mTeSR™ Plus 培养的多个 hPSC 系（H9、STiPS-M001、WLS-1C）中的定形内胚层进行分析。 数据表示为细胞的平均百分比 (± SEM)表达两个标记； n=3。
图 18. mTeSR™ Plus 培养的 hPSC 产生胰腺祖细胞
(A) 代表性密度图，显示使用 STEMdiff™ 胰腺祖细胞试剂盒进行分化后，在 mTeSR™1（每日补液）或 mTeSR™ Plus（限制补液）中培养的细胞中 PDX-1 和 NKX6.1 的表达。 (二)定量测量 PDX-1 和 NKX6.1 的共表达，使用 mTeSR™1 或 mTeSR™ Plus 维持的多个 hPS（H9、STiPS-M001、WLS-1C）细胞系中胰腺祖细胞形成的影响。 数据表示为细胞的平均百分比 (± SEM)表达两个标记； n=3。
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该产品是在 WiCell™ 研究所拥有的知识产权许可下开发的。 本产品仅根据不可转让、有限使用许可出售用于研究用途（无论买方是学术机构还是营利性实体）。 购买本产品不包括出于商业目的出售、使用或以其他方式转让本产品的权利（即出于考虑而进行的任何活动，例如使用本产品进行制造，或转售本产品或使用本产品制成的任何材料） ，或使用本产品或使用本产品制成的任何材料来提供服务）或临床使用（即，将本产品或使用本产品制成的任何材料施用于人体）或将使用本产品制成的任何材料植入到体内， 由营利性实体或与营利性实体合作进行的动物实验，用于除基本临床前研究应用（包括但不限于畸胎瘤测定）以验证细胞的功能以外的目的。 不同意上述条款和条件的购买者应将产品以可接受的条件退回给卖方以获得退款。
质量声明：
除非另有说明，产品仅供研究使用，不适用于人类或动物诊断或治疗用途。 有关 STEMCELL 质量的更多信息，请参阅 WWW.STEMCELL.COM/COMPLIANCE.
